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赫澎（上海）生物科技有限公司
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人多效生长因子(PTN)ELISA试剂盒-样品收集-处理及保存方法
498 人阅读发布时间：2020-11-24 17:39
赫澎（上海）生物科技有限公司
He Peng (Shanghai)Biotechnology Co.,Ltd.
手机:13122891558/QQ：1438227360 邮箱 ：hepeng20160718@foxmail.com
网址 ：www.hepengbio.com
本公司所有产品仅供实验室科学研究使用，不得用于医疗诊断，食品，化妆品和其他用途。
具体价格说明书，请联系客服索取！ 量大优惠！
检测原理:
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。
试剂盒组成:
样品收集、处理及保存方法：
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：edta、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
组织样本处理 （动物组织，肌肉 肝脏 肾脏 大便 植物组织等）
（组织匀浆的制备参考:
1、取组织块（0.1g～0.5g）最少可到5～10mg在冰冷的PBS中漂洗，滤纸拭干，准确称重，放入5ml的匀浆管中。
2、按重量(g):体积(ml)=1:9的比例加入9倍体积的匀浆介质于匀浆管中，冰水浴条件下,用眼科小剪尽快剪碎组织块。
3、匀浆的方式：手工匀浆，机器匀浆。
① 手工匀浆：左手持匀浆管将下端插入盛有冰水混合物的器皿中，右手将捣杆垂直插入套管中，上下转动研磨数十次（6～8分钟），充分研碎，制成10%的匀浆液。
② 机器匀浆：用组织捣碎机10000～15000 转/分 上下研磨制成10%组织匀浆，也可用内切式组织匀浆机制备（匀浆时间10秒/次，间隙30秒，连续3～5次，在冰水中进行,可适当延长匀浆时间），镜检观察:
4、将制备好的10%匀浆液用普通离心机或低温低速离心机3000转/分左右,离心10～15分钟，取上清液进行测定.
二、匀浆介质 一般采用0.05 mol/L Tris-HCl, pH 7.4 磷酸盐缓冲液(PBS),客户可根据样本及测定指标的情况自行设定浓度,目的是保持样本的等渗环境。）
细胞样本：a)对于贴壁细胞：去除培养液，用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。按照 6 孔板每孔细胞量加入150-250 ul裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。
b)对于悬浮细胞：离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。按照 6 孔板每孔细胞量加入 150-250 ul 裂解液的比例加入裂解液，再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成50-100万细胞/管，然后再裂解。
用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。
2、后处理：
将裂解后的样品10000-14000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的ELISA、Western和免疫沉淀等操作。
自备物品：
1.酶标仪（450nm）
2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3.37℃恒温箱
操作注意事项：
1. 试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
3. 浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。
4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5. 所有液体组分使用前充分摇匀。
代测服务：
凡是购买我司科研检测试剂盒产品，提供免费待测服务。【客户提供】
寄标本时需注明以下情况：
1 、标本编号； 2 、所测项目； 3 、是否做复孔； 3 、联系方式； 4 、实验后标本是否寄回。
实验要求，实验标本包括：血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等
样本注意事项：
客户收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。
对收集后当天进行检测的标本，储存在4 ℃备用。
对因特殊原因需要周期收集的标本，需将标本及时分装后放在-20 ℃或-70 ℃条件下保存，并避免反复冻融。
标本2-8 ℃可保存48小时，-20 ℃可保存1个月。-70 ℃可保存6个月
常见问题解答：
1.客户：试剂盒规格有哪些？
客服1：试剂盒分48t和96t两种规格。
2.客户：每盒试剂盒可以测多少样本？
客服1：48t测41个样，96t可以测89个样。
3.客户：试剂盒可以用于临床吗？
客服1：我们所提供的一切产品都是科研试剂盒，仅供科学研究，严禁用于医学诊断。
4.试剂盒保质期多久？
客服1：保质期6个月，都是当月批次。
5.试剂盒怎么保存运输？
客服1：2-8℃，避光防潮保存。运输泡沫盒加生物冰袋的。
具体咨询客服，索取详细试剂盒说明书！
免责声明：
1.以上说明为模板发布仅供参考，具体说明书可以联系客服索取。试剂盒仅供研究使用，不得用于临床实验或人体实验，否则所产生的一切后果，由实验者承担，本公司概不负责。
2.严格按照说明书操作，实验者违反说明书操作，后果由实验者承担。
He Peng (Shanghai)Biotechnology Co.,Ltd.
手机:13122891558/QQ：1438227360 邮箱 ：hepeng20160718@foxmail.com
网址 ：www.hepengbio.com
本公司所有产品仅供实验室科学研究使用，不得用于医疗诊断，食品，化妆品和其他用途。
具体价格说明书，请联系客服索取！ 量大优惠！
检测原理:
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。
试剂盒组成:
| 名称 | 96孔配置 | 48孔配置 | 备注 |
| 微孔酶标板 | 12孔×8条 | 12孔×4条 | 无 |
| 标准品 | 0.3mL*6管 | 0.3mL*6管 | 无 |
| 样本稀释液 | 6mL | 3mL | 无 |
| 检测抗体-HRP | 10mL | 5mL | 无 |
| 20×洗涤缓冲液 | 25mL | 15mL | 按说明书进行稀释 |
| 底物A | 6mL | 3mL | 无 |
| 底物B | 6mL | 3mL | 无 |
| 终止液 | 6mL | 3mL | 无 |
| 封板膜 | 2张 | 2张 | 无 |
| 说明书 | 1份 | 1份 | 无 |
| 自封袋 | 1个 | 1个 | 无 |
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：edta、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
组织样本处理 （动物组织，肌肉 肝脏 肾脏 大便 植物组织等）
（组织匀浆的制备参考:
1、取组织块（0.1g～0.5g）最少可到5～10mg在冰冷的PBS中漂洗，滤纸拭干，准确称重，放入5ml的匀浆管中。
2、按重量(g):体积(ml)=1:9的比例加入9倍体积的匀浆介质于匀浆管中，冰水浴条件下,用眼科小剪尽快剪碎组织块。
3、匀浆的方式：手工匀浆，机器匀浆。
① 手工匀浆：左手持匀浆管将下端插入盛有冰水混合物的器皿中，右手将捣杆垂直插入套管中，上下转动研磨数十次（6～8分钟），充分研碎，制成10%的匀浆液。
② 机器匀浆：用组织捣碎机10000～15000 转/分 上下研磨制成10%组织匀浆，也可用内切式组织匀浆机制备（匀浆时间10秒/次，间隙30秒，连续3～5次，在冰水中进行,可适当延长匀浆时间），镜检观察:
4、将制备好的10%匀浆液用普通离心机或低温低速离心机3000转/分左右,离心10～15分钟，取上清液进行测定.
二、匀浆介质 一般采用0.05 mol/L Tris-HCl, pH 7.4 磷酸盐缓冲液(PBS),客户可根据样本及测定指标的情况自行设定浓度,目的是保持样本的等渗环境。）
细胞样本：a)对于贴壁细胞：去除培养液，用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。按照 6 孔板每孔细胞量加入150-250 ul裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。
b)对于悬浮细胞：离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。按照 6 孔板每孔细胞量加入 150-250 ul 裂解液的比例加入裂解液，再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成50-100万细胞/管，然后再裂解。
用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。
2、后处理：
将裂解后的样品10000-14000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的ELISA、Western和免疫沉淀等操作。
自备物品：
1.酶标仪（450nm）
2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3.37℃恒温箱
操作注意事项：
1. 试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
3. 浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。
4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5. 所有液体组分使用前充分摇匀。
代测服务：
凡是购买我司科研检测试剂盒产品，提供免费待测服务。【客户提供】
寄标本时需注明以下情况：
1 、标本编号； 2 、所测项目； 3 、是否做复孔； 3 、联系方式； 4 、实验后标本是否寄回。
实验要求，实验标本包括：血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等
样本注意事项：
客户收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。
对收集后当天进行检测的标本，储存在4 ℃备用。
对因特殊原因需要周期收集的标本，需将标本及时分装后放在-20 ℃或-70 ℃条件下保存，并避免反复冻融。
标本2-8 ℃可保存48小时，-20 ℃可保存1个月。-70 ℃可保存6个月
常见问题解答：
1.客户：试剂盒规格有哪些？
客服1：试剂盒分48t和96t两种规格。
2.客户：每盒试剂盒可以测多少样本？
客服1：48t测41个样，96t可以测89个样。
3.客户：试剂盒可以用于临床吗？
客服1：我们所提供的一切产品都是科研试剂盒，仅供科学研究，严禁用于医学诊断。
4.试剂盒保质期多久？
客服1：保质期6个月，都是当月批次。
5.试剂盒怎么保存运输？
客服1：2-8℃，避光防潮保存。运输泡沫盒加生物冰袋的。
具体咨询客服，索取详细试剂盒说明书！
免责声明：
1.以上说明为模板发布仅供参考，具体说明书可以联系客服索取。试剂盒仅供研究使用，不得用于临床实验或人体实验，否则所产生的一切后果，由实验者承担，本公司概不负责。
2.严格按照说明书操作，实验者违反说明书操作，后果由实验者承担。