抗坏血酸含量测定试剂盒-赫澎生物

抗坏血酸含量测定试剂盒说明书

注意：正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。

货号：YX-W-A300
规格：100T/96S

产品内容：

提取液：液体120ml×1 瓶，4℃保存； 试剂一：液体6ml×1 瓶，4℃保存； 试剂二：液体5ml×1 瓶，4℃保存； 试剂三：液体6ml×1 瓶，4℃保存；
标准品：粉剂10mg×1 瓶（避光），4℃保存。（称取1mg加入10ml提取液，即为100μg/ml标准品）

试验中所需的仪器和试剂：

研钵、冰、低温离心机、可见分光光度计、1ml玻璃比色皿、可调式移液器和蒸馏水。

产品说明：

AsA 又称维生素c。AsA 是辅酶、自由基清除剂、电子共体/受体和草酸盐与酒石酸盐生物合成的底物等。作为植物细胞中最重要的抗氧化剂，AsA 在保护叶绿体免于氧化损伤起着举足轻重的作用， 也是衡量农作物产品品质的重要指标之一。
抗坏血酸具有较强还原能力将Fe3+还原成Fe2+，邻二氮菲与Fe2+会形成红色螯合物，在534nm处具
有强的吸收法，且吸光值与反应液中抗坏血酸含量呈正比。

操作步骤：

一、样品的前处理：

1. 组织：按照组织质量（g）：提取液体积(ml)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织， 加入1ml提取液）进行冰浴匀浆。8000g，4℃离心 20min，取上清置冰上待测。
2. 细菌、真菌：按照细胞数量（10个）：提取液体积（ul）为500~1000：1 的比例（建议500 万细胞加入1ml提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率 300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；8000g，4℃离心 20min，取上清液置冰上混匀待测。
3. 血清等液体：按照样本体积（g）：提取液体积(ml)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1ml 样本，加入1ml提取液）进行混匀。8000g，4℃离心 20min，取上清置冰上待测。

二、测定操作表：

1. 分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 534nm，提取液调零。
2. 测定前将所有试剂 37℃（哺乳动物）或 25℃（其它物种）水浴 5min 以上。
3. 标准曲线的绘制及样本测定（按顺序加入下列试剂）